古朵教您如何選購ELISA試劑盒時的相關(guān)參考標準
古朵教您如何選購ELISA試劑盒時的相關(guān)參考標準
目前,市面上的ELISA試劑盒價格參差不齊,偽劣產(chǎn)品眾多,我們到底該如何選擇呢?古朵生物技術(shù)小編整理的選購ELISA試劑盒時的相關(guān)參考標準,希望能夠為新手提供幫助!
一、根據(jù)樣本可獲得性來選擇試劑盒
通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時需謹慎。
二,經(jīng)費預(yù)算
說了半天,還是要看經(jīng)費的預(yù)算。沒經(jīng)費咋搞科研呢?公認的知名品牌一般質(zhì)量可靠,文獻引用多。但品牌由于進口和運輸?shù)瘸杀据^高,因此售價也較高。其實優(yōu)質(zhì)國產(chǎn)品牌也是不錯的選擇, 因省去不少物流和報關(guān)費用,與國外進口試劑盒相比價格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格, 如48tests小包裝,非常適合中國國情。實驗君可以上丁香通、小木蟲等行業(yè)資訊平臺或論壇等了解。
三、根據(jù)實驗物種及待檢樣品性質(zhì)來選擇
不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測這些物種的指標時,zui好要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在選擇試劑盒時,zui好要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來選擇試劑盒,必要時還要根據(jù)樣本來適當優(yōu)化。或在樣品收集前,zui好先閱讀一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需要謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有經(jīng)過多種來源組織樣本的驗證。這需要實驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但如果實驗君要了解組織樣品的制備問題,我們另起一文來總結(jié)。
四、認清訂購渠道
不論是還是國內(nèi)品牌,都需要在訂購前先與生產(chǎn)廠商詳細溝通產(chǎn)品細節(jié)(比如酶標板是否可拆卸),了解售前售后技術(shù)服務(wù)能力等。然后咨詢其訂購渠道,比如直接向廠家訂購或通過中國區(qū)或省級授權(quán)代理商經(jīng)銷商訂購。謹防偽劣產(chǎn)品,花了錢是小事,實驗數(shù)據(jù)的可靠性、真實性是大事呀,選擇正規(guī)渠道,選擇優(yōu)質(zhì)品質(zhì)!
五、細致比較試劑盒關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)
ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及交叉反應(yīng)性、回收率等。如果實驗君經(jīng)常開展ELISA實驗,建議使用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當然前提是實驗條件的一致性)。對于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產(chǎn)廠家使用的抗體對、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實力不盡相同,自然不同廠家試劑盒測出的數(shù)據(jù)會有差異。
六、根據(jù)樣品中檢測物水平來選擇試劑盒
如果實驗君對于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),zui好選擇寬動力學檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測范圍(標曲范圍), 也需做適當?shù)谋稊?shù)稀釋。在后計算結(jié)果時,需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
七、供應(yīng)商資質(zhì)評估
有些供應(yīng)商可提供數(shù)百種常用指標ELISA,然而有些供應(yīng)商則聲稱可提供數(shù)千種甚至上萬種指標的試劑盒,但質(zhì)量參差不齊,有濫竽充數(shù)禍害科研之輩。那如果選擇供應(yīng)商呢? 一是從同行或?qū)嶒炇彝帕私夤?yīng)商的口碑,售前售后的處理情況。第二查詢供應(yīng)商詳細了解相關(guān)指標,可查詢這些指標是否已經(jīng)開發(fā)出特異性抗體?如果查遍全球連抗體都還不可獲取,又如何開發(fā)出ELISA試劑盒呢? 第三文獻引用是王道,尤其是SCI期刊文章對供應(yīng)商產(chǎn)品的引用。第四了解供應(yīng)商的研發(fā)歷史和品牌史,很多供應(yīng)商頻頻換公司名或換公司注冊地,其中名堂實驗君應(yīng)該能悟出。
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