過濾應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)室中非常常見的實(shí)驗(yàn)，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后必須掌握的基礎(chǔ)技能。特別是做一些分析型的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，一般都會(huì)進(jìn)行稀釋和過濾。然而根據(jù)樣品量多量少的不同，需要選擇不同的過濾裝置。

可能很多小伙伴在做實(shí)驗(yàn)時(shí)，只是按部就班，師兄師姐讓怎么做就怎么做，也沒有思考太多原因?yàn)槭裁匆菢幼觥Ｄ敲?，今天我們就來系統(tǒng)地說說過濾的一些小妙招，知道這些，興許還會(huì)顛覆你之前的實(shí)驗(yàn)，至少還能讓實(shí)驗(yàn)效率提高一倍呢。

那么，先來說說針對(duì)小量樣品的過濾。

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一次性針頭式過濾器

一次性針頭式過濾器與一次性注射器配套使用，可組裝成一個(gè)簡(jiǎn)易的過濾裝置，適用于液體量小的過濾，量大或者不溶物過多會(huì)導(dǎo)致堵塞，主要應(yīng)用于樣品的預(yù)濾，實(shí)驗(yàn)室生物流體、培養(yǎng)基和媒介添加劑的除菌過濾。

02

millipore 超濾離心管

蛋白濃縮和換 Buffer 通常使用超濾離心管，有多種品牌，但是zui常用的要屬 Millipore 品牌。Millipore 有多種型號(hào)的供選擇，選擇合適的超濾管，主要視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定。

剛做實(shí)驗(yàn)的人員肯定會(huì)好奇到底選擇多大截留分子量比較合適呢？10kDa、5kDa、還是 30kDa？通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的 1/3，比如目的蛋白分子量為 35kDa，就可以選擇 10kDa 截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為 10kD 左右，則可以用截留分子量 3kD 的超濾管。使用時(shí)，需要將超濾離心管放在離心機(jī)中，一定要注意質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡，且轉(zhuǎn)速不可太快，否則直接損壞超濾膜。超濾管是可重復(fù)使用的，使用一次就扔掉確實(shí)太浪費(fèi)；但也不會(huì)使用太多次，一般也就用一兩次就換新的。

保存時(shí)要特別注意，將超濾離心管的超濾膜泡在疊氮鈉溶液或 20% 的乙醇溶液中，防止長(zhǎng)菌，而且防干，只要超濾膜浸了水，就不可以再讓它干，否則超濾膜的分子結(jié)構(gòu)就變了。切記不可以用超聲洗滌。

接下來，要講的是針對(duì)大量樣品的過濾：一般是濾膜與濾杯配套使用。

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微孔濾膜

一次性針頭式過濾器雖然方便，但是只能過濾少量樣品。當(dāng)需要大量過濾時(shí)，可以選擇微孔濾膜結(jié)合進(jìn)行濾杯過濾。微孔濾膜主要用于樣品分析特別是色譜分析中流動(dòng)相及樣品的過濾，對(duì)保護(hù)色譜柱及輸液泵管路系統(tǒng)和進(jìn)樣閥等不被污染具有良好的作用。

目前已廣泛應(yīng)用在重量分析、微量分析、膠體分離及無菌實(shí)驗(yàn)中。與一次性針頭式過濾器一樣，膜的直徑分別有 47、50 mm，其孔徑分為 0.22、0.45 μm，同樣分為有機(jī)系和水系，過濾樣品時(shí)根據(jù)液體的性質(zhì)對(duì)應(yīng)選擇。

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攪拌式超濾杯

在操作大體積樣本時(shí)，Millipore 標(biāo)準(zhǔn)的 Amicon Ultra 超濾管（0.5/2/4/15mL）已經(jīng)明顯不能滿足需求，這時(shí)超濾杯就非常必要了。Amicon 攪拌式超濾杯方便好用，功能非常強(qiáng)大。比一代超濾杯設(shè)計(jì)更加符合人體工程學(xué)，組裝、拆卸以及開關(guān)都為方便。

配套膜片選擇更廣，包括超濾膜和微濾膜以及您自選的膜片。可進(jìn)行溫和濃縮、脫鹽、換液，更適合大體積病毒、外泌體/囊泡、蛋白溶液等樣品，同時(shí)，提供操作視頻和中文指南，技術(shù)支持完備。另外，多種容量可選：50mL，200mL 和 400mL，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇。

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真空過濾器

一次性真空式過濾器由透明高分子材料聚苯乙烯（GPPS）制成，利用真空泵提供壓力差，用于組織培養(yǎng)液和其他實(shí)驗(yàn)室流體溶液的大量過濾，樣品處理量可達(dá)數(shù)升，過濾后的樣品可直接以無菌的收集瓶保存。4 種上杯的過濾膜類型可選：MCE、尼龍、PVDF 和 PES。膜孔徑范圍：0.10μm，0.22μm，0.45μm；外置有一個(gè)抽真空小孔，可一次性快速過濾大量實(shí)驗(yàn)流體。

過濾裝置穩(wěn)定，重心低，可防止樣品濺出。易讀取標(biāo)志顯示濾過容量。運(yùn)輸過程中，優(yōu)質(zhì)防塵塑料密封式袋子單個(gè)內(nèi)包裝，不易污染。另外，可配有單獨(dú)的過濾器上杯和收集瓶，以供不同實(shí)驗(yàn)要求選用。

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濾杯

這款濾杯可直接接藍(lán)蓋瓶，可反復(fù)使用。不需用抽濾瓶，接上真空泵可直接使用。收集瓶帶有刻度，濾過液可直接保存于收集瓶。可高壓滅菌，重復(fù)使用，更經(jīng)濟(jì)劃算。適用濾膜直徑為 47 毫米。使用時(shí)，過濾樣品無需單獨(dú)清洗，有機(jī)溶液殘留會(huì)揮發(fā)掉，水溶液也會(huì)自行蒸發(fā)干。

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多聯(lián)過濾器

多聯(lián)過濾器專為多個(gè)樣品同時(shí)過濾而設(shè)計(jì)制造。目前，實(shí)驗(yàn)室在對(duì)溶液進(jìn)行過濾時(shí)，一般采用玻璃材質(zhì)砂芯過濾裝置，這種方法每次只能過濾一個(gè)樣品，過濾速度慢，效率低，人工勞動(dòng)強(qiáng)度大。對(duì)于需要同時(shí)過濾多個(gè)樣品的操作者，選擇使用多聯(lián)過濾器更為方便。由于它的每一個(gè)過濾架均有的控制閥門，因此僅需用一個(gè)真空泵便可支持單聯(lián)或多聯(lián)同時(shí)操作。全不銹鋼材質(zhì)的多聯(lián)過濾器支架可在 180℃ 的高溫下進(jìn)行過濾操作；鋁合金夾子設(shè)計(jì)合理緊密，可以方便地將濾杯與中間過濾頭合在一起并保證嚴(yán)格密封而不會(huì)漏液。同時(shí)，316L 衛(wèi)生級(jí)不銹鋼材質(zhì)耐酸堿，耐腐蝕，易于高溫消毒，使分析結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。