如何選擇二抗
什么是二抗？
二抗是指用于靶向結合一抗的抗體。在多種免疫印跡、ELISA以及免疫熒光等免疫實驗中，二抗經(jīng)常和一抗結合使用以檢測目標蛋白。很多二抗都帶有標記物，例如Alexa Fluor熒光染料或辣根過氧化物酶（HRP），從而使二抗的信號可以被檢測到。
實驗中也可以使用帶有標記物的一抗，但是二抗有很多優(yōu)點。無論是使用哪種一抗進行檢測，使用二抗可便于換不同的標記物。例如，同樣的一抗可以與HRP標記二抗一起用于免疫印跡，也可以與另一種Alexa Fluor 488熒光標記二抗一起用于免疫熒光實驗。
另外，二抗結合在抗原位置的標記染料比直標一抗要多，從而增強檢測信號。使用二抗可以避免對一抗進行復雜且昂貴的化學標記（偶聯(lián)），而且偶聯(lián)反應（具有氨基酸特異性）可能干擾一抗對抗原的識別。
選擇合適的二抗
要選擇出一種適用于您的應用和研究的佳二抗，建議考慮以下因素：
- 種屬來源和種屬反應性
- 特異性反應
- 純化方法
- 交叉吸附
- 多重檢測能力
- 抗體類型和亞型
- 完整抗體還是抗體片段
- 標記物
- 生物素結合蛋白
