古朵帶您了解凝膠遷移實驗常見問題?
標簽：凝膠遷移實驗 古朵生物 凝膠電泳
古朵帶您了解凝膠遷移實驗常見問題?
凝膠遷移實驗常見問題
1、為什么看不到遷移帶?
1)蛋白樣本提取質量不高，蛋白降解或者提取量不足。
2)樣本中沒有可以與探針結合的蛋白。
3)探針與蛋白無特異性的相互作用。
4)轉膜效率低，蛋白或者探針未轉移到膜上。
5)曝光或者成像時間過短。
在Super-Shift EMSA測定中看不到Super-Shift DNA/蛋白復合物帶還可能有以下原因：
6)抗體沒有工作。不是所有的抗體都可以用于Super-Shift EMSA，只有對非變性蛋白的表面抗原決定簇起反應的抗體才能夠用于Super-Shift EMSA。
7)測定的活化的DNA/蛋白復合物中沒有希望檢測的構成成分存在。此時既看不到Super-Shift的帶，也看不到DNA/蛋白復合物的量的減少
8)使用的抗體過度稀釋。一般10-20ul的反應液需要使用0.5-1ul原倍的抗體。
9)多抗與DNA/蛋白復合物形成大的聚集物而不進膠。在這種情況下，雖然看不到Super-Shift的帶，但應當可以看到DAN/蛋白復合物的電泳帶明顯減少。
古朵帶您了解凝膠遷移實驗常見問題?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。
