古朵帶您了解豬旋毛蟲（Trichinella）ELISA試劑盒使用方法

  豬旋毛蟲(Trichinella)ELISA試劑盒使用方法操作步驟

  將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

  加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

  加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

  溫育：操作同3。

  洗滌：操作同5。

  顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

  終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

  測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

  計算和結果判定：

  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10

  臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUT OFF）者為旋毛蟲(Trichinella)陰性

  陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUT OFF）者為旋毛蟲(Trichinella)陽性

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