古朵解析:白介素6的實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒
古朵解析:白介素6的實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒
僅供科研使用。用于體外定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-6濃度。使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書并檢查試劑組分是否完整,如有疑問請(qǐng)咨詢古朵生物,我們將提供力所能及的幫助。
IL-6簡(jiǎn)介:
白介素6(IL-6)是一類多功能的蛋白,在宿主防御,急性期反應(yīng),免疫反應(yīng),造血功能,神經(jīng)系統(tǒng)等方面起到重要的作用。根據(jù)來源不同,白介素6分子量從21到28kDa不同,但均為單鏈蛋白。白介素6在多種細(xì)胞中都有表達(dá),如T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、纖維原細(xì)胞、肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等。由于IL-6具有不同的活性,所以IL-6也被稱為干擾素β2(IFN-β2)、B細(xì)胞刺激因子-2(BSF-2)、雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)因子、肝細(xì)胞刺激因子、毒性T細(xì)胞分化因子、巨噬細(xì)胞粒細(xì)胞誘導(dǎo)因子(MGI-2A)等。白細(xì)胞介素6在B-細(xì)胞向Ig分泌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過程起到重要的作用,參與了淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的分化,誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞在B-細(xì)胞,T-細(xì)胞,肝細(xì)胞,造血干細(xì)胞以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分化作用。此外,肌肉運(yùn)動(dòng)收縮作用后白細(xì)胞介素6會(huì)被釋放到血液中,進(jìn)而能促進(jìn)脂肪的分解并改善機(jī)體的胰島素耐受性。
檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)樣本中小鼠IL-6的濃度。小鼠IL-6捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí),其中的小鼠IL-6會(huì)與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠IL-6抗體后,抗小鼠IL-6抗體與小鼠IL-6接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來;其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。zui后加入顯色劑,若樣本中存在IL-6將會(huì)形成免疫復(fù)合物,辣根過氧化物酶會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測(cè),讀其450nm處的OD值,小鼠IL-6濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照未知樣本中OD值,即可算出標(biāo)本中IL-6濃度。
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