ELISA試劑盒是檢測抗體還是抗原?
ELISA試劑盒是檢測抗體還是抗原?
抗體:抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產生的具有保護作用的蛋白質。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌,被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質,僅被發現存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個特征,該外來目標被稱為抗原。
主要功能:
抗體的功能與其結構密切相關。同一抗體的V區和C區的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區和C區在結構變化上具有一定的規律,又使得其在功能上存在共性。V區和C區的組成和結構,決定了抗體的生物學功能。
抗原:抗原(antigen,縮寫Ag)是指能引起抗體生成的物質,是任何可誘發免疫反應的物質。外來分子可經過B細胞上免疫球蛋白的辨識或經抗原呈現細胞的處理并與主要組織相容性復合體結合成復合物再活化T細胞,引發連續的免疫反應。
抗原在化學結構上與機體自身不同,具有異物性:
①異種物質。從生物進化過程來看,異種動物間的血緣關系越遠,則免疫原性越強。如馬的血清和各種微生物與人的血緣關系遠,所以免疫原性強。而馬的血清與驢、騾的血緣關系近,所以免疫原性相對就弱。
②同種異體物質。如人的紅細胞抗原物質和人的白細胞抗原等。
③自身物質。自身物質一般不具免疫原性。有些物質如隱蔽的自身成分(眼晶體蛋白、精子等),在正常情況下與免疫系統是隔絕的。但是一旦屏障遭到破壞,這些物質進入血流,即可與免疫活性細胞接觸而成為自身抗原異物。另外,自身物質在外傷、感染、藥物和射線的影響下,其理化性質發生質的改變時,也可成為具有免疫原性的抗原物質。
(1)檢測抗原 :
常用于檢測抗原的辦法對錯競賽性的雙抗體夾心法,其次是競賽法。但競賽法在具體實驗中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,由于需求標記抗原,這關于某些抗原是很難做到的,乃至是不可能的。別的在競賽法中,酶標記的抗原與標本直接混合在一起,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質,可影響ELISA的結果。
(2)檢測抗體 :
檢測抗體品種常用的辦法是檢測抗體品種的捕獲法,這個辦法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個辦法的*步是捕獲所需求檢測的一個品種的抗體,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。直接ELISA在檢測IgG時比較簡單,但不適用于檢測其他品種的抗體,由于血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競賽結合抗原。
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