古朵生物：ELISA試劑盒變質的原因
ELISA試劑盒變質的原因
在ELISA實驗中我們經常會碰到試劑盒變質的問題，是什么原因導致了ELISA試劑盒的變質呢?接下來古朵生物技術小編和大家說一說導致ELISA試劑盒變質的原因有哪些。
導致ELISA試劑盒變質的原因主要分為七種：
1、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響，結果重復性較差，質量較難控制。
2、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量一致，即使是通過批檢的項目其檢測結果也會存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。 嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結果的穩定性;對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。
3、樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
4、操作因素
ELISA操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
5、灰區的設置
通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定結果報告的依據。
6、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜，影響因素較多，即使室內質控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法。
7、表示結果的常用方法
①定性測定。
②半定量測定，結果一般以滴度表示。
③定量測定，即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定，繪制標準曲線，結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。
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