古朵新聞：ELISA實驗之洗滌要點
古朵新聞：ELISA實驗之洗滌要點
古朵生物總結ELISA實驗要點，希望能對大家的實驗有所幫助：
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗，ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應討星中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質，聚苯乙燒等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應巴這種非持異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA提作中，洗滌是主要的關鍵技術，應引起提作者的高度重視，不得馬虎。
洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工提作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下:
1.浸泡式
D吸干或甩干孔內反應液
0用洗滌液過過洗一遍:3浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1~ 2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短:9吸干孔內液體，吸干應徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾上拍干5重復提作0和9，洗滌3~4次。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數或延長浸泡時間.
2.流水沖洗式流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸水浸泡2分鐘，吸干即可，浸泡式猶如盤浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果為徹底，目也簡便、快速。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也適用干微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果佳。
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