古朵生物:ELISA試驗中如何防止產生氣泡
ELISA試驗中如何防止產生氣泡
ELISA實驗過程中,通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內反應不均一。在做實驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產生氣泡。
實驗過程產生氣泡原因及后果:
1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸。
2.孔內反應不均一。
3.包被時有氣泡的話,將導致包被不完全實際包被量下降,實驗結果弱陽性甚至假陰性。
4.封閉時有氣泡的話,將導致大量未結合位點的存在,引起非特異性結合,實驗結果本底增高,假陽性。
5.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效結合,實驗結果弱陽性甚至假陰性。
6.加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效結合實驗結果弱陽性甚至假陰性(競爭法相反。實驗結果假陽性)。
7.加顯色液時有氣泡的話,實驗結果顯色不完全。
8.加終止液時有氣泡的話(1、不能完全終止反應 2、影響酶標儀比色,OD值增高)
9.洗滌時有氣泡的話,非特異性結合物不能完全洗去,做無用功。
一般氣泡都是集合在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有用觸摸,使孔內反響不均一。
包被時有氣泡的話,將導致包被不徹底實踐包被量下降--弱陽性乃至假陰性。
關閉時有氣泡的話,將導致很多未結合位點的存在,引起非特異性結合--本底增高,假陽性。
加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性。
加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
加顯色液時有氣泡的話---顯色不徹底。
加停止液時有氣泡的話,1。不能徹底停止反響 2。影響酶標儀比色,OD值增高
洗刷時有氣泡的話,非特異性結合物不能徹底洗去,做無用功。
防止辦法:
1。加樣時盡量接近孔底(不要觸摸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
2。關閉時一定要加滿孔,
3。洗刷時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來zui終驅除。手藝洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒


