48t/96t 小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒檢測(cè)原理
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產(chǎn)品名稱(chēng):48t/96t 小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒檢測(cè)原理
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠(chǎng)商:上海古朵生物科技有限公司
簡(jiǎn)單介紹
48t/96t 小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒檢測(cè)原理的詳細(xì)介紹
中文名:小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個(gè)月
產(chǎn)品特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)設(shè)備:酶標(biāo)儀, 37℃恒溫箱,自動(dòng)洗板機(jī),可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭,蒸餾水,干凈的試管,容量瓶等。
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域:本ELISA試劑盒限科研,嚴(yán)禁臨床使用。
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。
用途:科研實(shí)驗(yàn)所用,不作臨床使用。
小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒特點(diǎn):
檢測(cè)動(dòng)物種類(lèi):
人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚(yú)、斑馬魚(yú)等
檢測(cè)標(biāo)本類(lèi)型:
血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、唾液、關(guān)節(jié)滑液、肺泡灌洗液等
檢測(cè)指標(biāo):
趨化因子、生長(zhǎng)因子、抑制因子、炎癥因子、營(yíng)養(yǎng)因子、脂肪因子、血管生成因子、動(dòng)脈粥樣硬化因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等
實(shí)惠點(diǎn):
原裝進(jìn)口分裝:專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持,可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,的產(chǎn)品質(zhì)量,
高靈敏度、高度,高重現(xiàn)性,高特異性。不僅有高可靠性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,更為您節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本和時(shí)間。
技術(shù)服務(wù):
從標(biāo)本采集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)。
小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒組成:
(1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒檢測(cè)原理 操作流程:
1. 蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒(人/大小鼠等)從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
小鼠蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如樣品濃度過(guò)高時(shí),行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔50μl,注意不要有氣泡。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁。
2. 每孔加酶結(jié)合物50μl。輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)60分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl,37℃避光顯色(15分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
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