上海古朵生物專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒，詳細(xì)為您介紹人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒的性點(diǎn)，用途，價(jià)格，規(guī)格，操作說(shuō)明書(shū)，操作步驟等詳情，本司長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)動(dòng)物血清，培養(yǎng)基，抗體，化學(xué)試劑，生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，染色液，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測(cè)試劑盒，為客戶提供代測(cè)ELISA試劑盒服務(wù)，所銷售的ELISA試劑盒種屬涵蓋了大鼠，小鼠，人，豚鼠，植物，馬，鴨，雞，兔，豬，狗及其他動(dòng)物，歡迎來(lái)電咨詢更多ELISA試劑盒種屬!

  中文名：人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒

  別名：人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit

  供應(yīng)商：上海古朵

  規(guī)格：48t/96t

  保存：2-8℃

  有效期：6個(gè)月

  產(chǎn)品特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

  產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)設(shè)備：酶標(biāo)儀， 37℃恒溫箱，自動(dòng)洗板機(jī)，可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。

  產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域：本ELISA試劑盒限科研，嚴(yán)禁臨床使用。

  特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。

  檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞之前，必須根據(jù)以下方向的測(cè)定。

  1.貼壁細(xì)胞應(yīng)分離胰蛋白酶和離心后收集(懸浮細(xì)胞將離心收集直接)。

  2.洗細(xì)胞三次冷PBS。

  3.懸浮細(xì)胞在PBS(1×)和細(xì)胞受超聲處理4次(或≤冷凍細(xì)胞-20°C。用溫和的混融細(xì)胞。3次重復(fù)凍結(jié)/解凍周期。)

  4.在1500×g離心10分鐘在2到8攝氏度去除細(xì)胞碎片。

  5.細(xì)胞培養(yǎng)上清和其他生物液體在1000×g離心20分鐘去除樣品顆粒和即刻檢測(cè)或者商店樣品在-20°C或稀釋后使用80oC。避免重復(fù)凍結(jié)/解凍循環(huán)。

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測(cè)試劑盒液體類標(biāo)本：

  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

  1)血清：

  室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

  2)血漿：

  應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

  3)尿液：

  用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

  4)細(xì)胞培養(yǎng)上清：

  檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

  5)組織標(biāo)本：

  切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒問(wèn)題解析：

  1.試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。

  2.加樣中可能遇到的問(wèn)題：在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候，會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況，這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí)，然后在進(jìn)行離心處理

  3.洗板時(shí)容易造成誤差： 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的，這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)

 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒操作步驟：

  1. 每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。

  2. 將板置于37℃溫育30分鐘。

  3. 甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。

  4. 每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。

  5. 將板置于37℃溫育30分鐘。

  6. 甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。

  7. 每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。

  8.每孔加終止液50ul，于450nm波長(zhǎng)讀O.D.值。

人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

  4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

  6.底物請(qǐng)避光保存。

  7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

  10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

  人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測(cè)試劑盒組織結(jié)構(gòu)：

  1、 血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心23分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

  2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

  3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘，取上清液。

  5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。