人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒說明書，應用領域：ELISA試劑盒等產品滿足于生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學等生物實驗需求，不用于臨床診斷。

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中文名：人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA 試劑盒
別名：人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit
供應商：上海古朵
包裝規格：液體盒裝 96T/48T
保存：2~8℃
有效期：6個月
試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。
應用領域：ELISA試劑盒等產品滿足于生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學等生物實驗需求，不用于臨床診斷。
檢測目的:用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
主要用于科研方面，不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。


人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒說明書 雙抗體夾心法(檢測未知抗原):
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒說明書 技術原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。


人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒說明書 處理保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒說明書 操作注意事項：
(1).實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
(2).試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
(3).使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。 (4).不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
(5).洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
(6).使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(7).加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
(8).按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
(9).底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。



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