雞腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒說明書，實驗原理：定量/定性夾心法，定量/定性競爭法

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中文名：雞腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒
規格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
檢測樣本：血清、EDTA-血漿、細胞上清液
實驗原理：定量/定性夾心法，定量/定性競爭法


實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質，再與HRP標記 的待測物質抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終 的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度。



雞腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒說明書 標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
樣品收集、處理及保存方法：
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


雞腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒說明書 產品特點與：
1）靈敏度高，檢測時間短，只需4小時
2）成本低，操作簡單
3）樣本多樣，血漿、尿液、細胞上清液等
4）檢測適用于多種不同動物物種
5）標準范圍廣，允許使用高濃度樣本


雞腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒說明書特點：
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術都能在較短時間內完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產應用單位均易購置.