人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒說明書，檢測目的:用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

中文名：人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒
供應商：上海古朵
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50-100ul
保存：2-8℃,避光保存
有效期：六個月
種屬：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等
檢測目的:用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。



人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒說明書 使用原理：
1，ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2，結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
3，在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
4，用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。
5，此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
6，由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。



人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒說明書 標本要求：
1，本公司ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中所測指標的水平
2，標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗
3，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
4，不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。


人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒說明書 在實驗中的幾個重要的操作步驟:
一、加樣
1.1 樣品稀釋液少加，或血清多加，都會引起本底增高。對于間接法來說，受上述兩個因素影響更大。因為血清中受檢的特異性IgG 只占總IgG 中的一小部分。IgG 的吸附性很強，非特異IgG 可直接吸附到固相載體上，有時也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異的IgG均可以和酶標二抗發生反應而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多，高于規定的稀釋倍數，必將帶來陰性高值。
1.2 酶結合物的不正確加入。一般來講，酶也有一定的非特異吸附，將包被好的酶聯板再封閉，一方面也可避免酶的非特異性吸附。通常每孔加入的封閉液為120μl。如果加入的酶多于120μl 或加在較高的孔壁上或孔口，也會引起本底升高或假陽性。



二、溫育
2.1 由于試劑盒確定的一定溫度下的反應時間并不是反應的終點，升高反應的溫度，會加快反應，同樣增加時間會延長反應，這樣得到的反應程度會比試劑盒確定的反應程度多，也會引起陰性高值或假陽性。
2.2 由于試劑盒通常設定的反應溫度為37 度，在這個溫度下放置30 分鐘，蒸發的水分會很多，對于整個反應體系來講，各種反應物的濃度會不斷增加，這樣必會導致反應后的值升高。因此溫育時應蓋上膠貼。
2.3 試劑盒在設計時，反應是在靜置條件下完成的，如果反應改變為振動條件，會加快分子的熱運動，增加反應的機會。
2.4 試劑盒的溫育過程是在培養箱中進行，這和水浴的條件不一樣。水浴可是酶聯板迅速升溫，但較難將溫度控制在較穩定的溫度，往往高于37 度，同樣會引起高值陰性。



三、洗板
3.1 各個廠家使用的洗液配方是不同的，是根據各自試劑的條件配制的，采用不配套的洗液常會得到不正常的反應結果，包括本底過高。本公司的洗液采用獨特的洗滌系統不能和其它公司的試劑盒混用。
3.2 試劑盒中提供的洗液是濃縮的，應該稀釋到規定的倍數使用，過多稀釋洗液，會影響洗液的效果，而使反應的本底過高。
3.3 稀釋洗液的水應該是新鮮的蒸餾水，電導率小于1.2μs。如果水中含有過多的Ca2+、Mg2+，這些離子會占用表面活性劑，影響洗滌效果。
3.4 洗板時，應每孔加滿洗液，如果加入的洗液液量不夠，對洗滌的效果影響也是很大的。本公司的酶聯板板孔為400μl，比別的廠家的板孔大，因此洗了別公司的板后要及時調整液量，以避免加液量不滿。
3.5 洗板的次數不夠孔內多余的抗原（抗體）或酶結合物不能徹底去除，也會因此本底升高。
3.6 洗板的強度和洗板的浸泡時間是密切相關的。洗板機不同，使用的泵不同，液體加入時的沖力不同。如果加入洗液的沖力不大，也沒有設定浸泡時間，同樣會使結果的A 值偏高。
3.7 洗板完畢后，要進行拍板，盡量采用質量好的毛巾和吸水紙，使用易掉渣的紙，紙屑會留在板孔中，由于紙屑中含有氧化劑而造成高值陰性。


四、顯色
4.1加A、B 液準確，順序不能顛倒，要及時終止顯色。終止后要在3 分鐘內讀數，否則強陽性會變低。