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主營產品: 科研人類ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒代測,小鼠ELISA試劑盒廠家
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48t/96t 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒
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48t/96t 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒

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產品名稱:48t/96t 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒

產品型號:48t/96t

產品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡單介紹

人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒,樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

48t/96t 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒的詳細介紹

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中文名:人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒

英文名:Human Pulmonary surfatcant-associated protein C,SP-C ELISA Kit

供應商:上海古朵

規格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6個月

樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

運輸方式:現貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。

檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。




人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒  血漿樣本直接測定前處理方法:

(1)加酶抑制劑:準確采全血若干毫升,注入預冷的加有抗凝劑的塑料指形管中,迅速低溫離心,取血漿低溫保存待測。抑肽酶有液體的與固體的。固體的抑肽酶可用生理鹽水溶解。

(2)酸化處理:每毫升血漿加1mol/l HCl 0.2ml,低溫保存待測。以上兩種方法,任選一種即可。

血漿樣本的間接測定 血標本經提取后,可去除蛋白質等干擾因素,并使微量的生物活性肽濃縮,但較費時,成本也高。常用的提取方法有:

(1)柱層析提取法:有多種層析柱可供提取不同的神經肽,其中較為方便的是用Sep-pak C18層析柱提取。主要步驟:

①柱的預處理:該柱有兩頭,長頭連接注射器,可注入溶液與樣品,短頭為排出口。預處理時注入乙腈10ml。蒸餾水20ml,使柱中的生物膠活化。

②注入樣品(如血漿、腦脊液、腹水、尿等):樣品中的水份流出,生物活性肽、蛋白及雜質等吸附在生物膠上。血漿上柱前,如先去除蛋白,可增加柱子的使用時間。

③淋洗:用4%HAC溶液100ml注入柱中,以洗去一些雜質。

④洗脫:用7ml酸性乙腈作為洗脫劑,注入柱中,把生物活性肽洗脫下來,收集在塑料指形管中。

⑤清洗:用乙腈、蒸餾水清洗柱子,以備后用。

⑥將洗脫液吹干,低溫保存待測。測定時可加入一定量的緩沖液溶解。

人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)試劑盒  操作步驟:

1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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