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48T/96t 犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理
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48T/96t 犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理

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產品名稱:48T/96t 犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理

產品型號:48T/96t

產品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡單介紹

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48T/96t 犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理的詳細介紹

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產品名稱:犬維生素E(VE)ELISA試劑盒
產品別名:犬維生素E(VE)ELISA Kit
規格:48t/96t
保存:-3~8℃
有效期:6個月
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
運輸方式:現貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。



犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理洗板方法:
1.手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
2.自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
說明
1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
2.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
4.所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
5.有效期:6個月。
6.本操作說明適用于48T試劑盒,但48T試劑盒所有試劑減半。
7.電子版說明書僅供參考,實際操作請按照隨產品發送的印刷版說明書;中英文說明書可能會有不一致的地方,以英文說明書為準。



技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。


犬維生素E(VE)ELISA試劑盒技術原理操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。



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