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主營(yíng)產(chǎn)品: 科研人類ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),大鼠ELISA試劑盒代測(cè),小鼠ELISA試劑盒廠家
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48T/96t 血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
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48T/96t 血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品名稱:48T/96t 血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):48T/96t

產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡(jiǎn)單介紹

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48T/96t 血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒的詳細(xì)介紹

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中文名:血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA 試劑盒
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個(gè)月
樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn):敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。
用途:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
運(yùn)輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。



血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒 操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。



血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒 ELISA 試劑盒 17 個(gè)相關(guān)操作技巧如下:

  1. 切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
  2. 合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
  3. 在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4. 務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的度
  5. 樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
  6. 為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于 2-8℃ 保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液。
  8. ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
  9. 剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
  10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào) OD 值至零。
  12. 手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置 15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13. 對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
  14. 沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。
  15. 在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
  16. 吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。
  17. 吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。


技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。


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