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中文名：腎病蛋白(nephrin)ELISA 試劑盒
規格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式：現貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。


腎病蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 檢測試劑注意事項：
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時內進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復凍融。
6． 在反復清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精que度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。


操作時注意事項：
1. Elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔一孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5.嚴格按說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
6.本試劑不同批號組分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.底物請避光保存。


腎病蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。





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